എന്താണ് എൻഡോടോക്സിൻ ടെസ്റ്റ്?

എന്താണ് എൻഡോടോക്സിൻ ടെസ്റ്റ്?

ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയയുടെ പുറം മെംബ്രണിൻ്റെ ഭൂരിഭാഗവും രൂപപ്പെടുന്ന ലിപ്പോപൊളിസാക്കറൈഡ് കോംപ്ലക്സിൻ്റെ ഭാഗമായ ഹൈഡ്രോഫോബിക് തന്മാത്രകളാണ് എൻഡോടോക്സിനുകൾ.ബാക്ടീരിയകൾ മരിക്കുകയും അവയുടെ പുറം ചർമ്മങ്ങൾ ശിഥിലമാകുകയും ചെയ്യുമ്പോൾ അവ പുറത്തുവരുന്നു.പൈറോജനിക് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ പ്രധാന സംഭാവനയായി എൻഡോടോക്സിനുകൾ കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു.പൈറോജനുകളാൽ മലിനമായ പാരൻ്റൽ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ മനുഷ്യരിൽ പനി, കോശജ്വലന പ്രതികരണം, ഷോക്ക്, അവയവങ്ങളുടെ പരാജയം, മരണം എന്നിവയ്ക്ക് കാരണമാകും.

ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയയിൽ നിന്നുള്ള എൻഡോടോക്സിനുകൾ കണ്ടെത്തുന്നതിനോ അളക്കുന്നതിനോ ഉള്ള പരിശോധനയാണ് എൻഡോടോക്സിൻസ് ടെസ്റ്റ്.

ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ ഉൽപന്നങ്ങളിലെ എൻഡോടോക്‌സിനുകൾ ആദ്യം കണ്ടെത്താനും അളക്കാനും മുയലുകളെ ഉപയോഗിക്കുന്നു.യുഎസ്‌പി പ്രകാരം, ആർപിടിയിൽ താപനിലയിലെ വർദ്ധനവ് അല്ലെങ്കിൽ മുയലുകളിലേക്ക് ഫാർമസ്യൂട്ടിക്കൽ ഇൻട്രാവണസ് കുത്തിവയ്‌പ്പിന് ശേഷമുള്ള പനി നിരീക്ഷിക്കുന്നത് ഉൾപ്പെടുന്നു.കൂടാതെ 21 CFR 610.13(b) ന് നിർദ്ദിഷ്‌ട ജൈവ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾക്കായി ഒരു മുയൽ പൈറോജൻ ടെസ്റ്റ് ആവശ്യമാണ്.

1960-കളിൽ ഫ്രെഡ്രിക്ക് ബാംഗും ജാക്ക് ലെവിനും ഹോഴ്‌സ്‌ഷൂ ഞണ്ടിൻ്റെ അമിബോസൈറ്റുകൾ എൻഡോടോക്‌സിനുകളുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ കട്ടപിടിക്കുമെന്ന് കണ്ടെത്തി.ദിലിമുലസ് അമെബോസൈറ്റ് ലൈസേറ്റ്(അല്ലെങ്കിൽ Tachypleus Amebocyte Lysate) മിക്ക RPT കളും മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നതിനായി വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു.USP-യിൽ, LAL ടെസ്റ്റിനെ ബാക്ടീരിയൽ എൻഡോടോക്സിൻ ടെസ്റ്റ് (BET) എന്ന് വിളിക്കുന്നു.കൂടാതെ 3 ടെക്നിക്കുകൾ ഉപയോഗിച്ച് BET ചെയ്യാവുന്നതാണ്: 1) ജെൽ-ക്ലോട്ട് ടെക്നിക്;2) ടർബിഡിമെട്രിക് ടെക്നിക്;3) ക്രോമോജെനിക് സാങ്കേതികത.LAL ടെസ്റ്റിനുള്ള ആവശ്യകതകളിൽ ഒപ്റ്റിമൽ pH, അയോണിക് ശക്തി, താപനില, ഇൻകുബേഷൻ സമയം എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.

RPT-യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, BET വേഗമേറിയതും കാര്യക്ഷമവുമാണ്.എന്നിരുന്നാലും, BET ന് RPT പൂർണ്ണമായും മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാനായില്ല.കാരണം, LAL വിശകലനം ഘടകങ്ങളാൽ തടസ്സപ്പെട്ടേക്കാം, കൂടാതെ ഇതിന് നോൺ-എൻഡോടോക്സിൻ പൈറോജനുകൾ കണ്ടെത്താനാകുന്നില്ല.